Сап. Клинический осмотр и маллеинизация лошадей
При жизни сап диагностируют по клинической картине, результатам маллеинизации и исследования крови по РСК.
Симптомы сапа у лошадей довольно характерны. При исследовании надо дифференцировать сап от мыта и эпизоотического лимфангита. Осматривать лошадей следует в защитном костюме, соблюдая все меры предосторожности, обязательные при работе с особо опасными зооантропонозными болезнями.
Клинический осмотр лошади на сап рекомендуется проводить в такой последовательности:
1) внешний осмотр лошади и исследование наружных покровов. Обращают внимание на состояние упитанности лошади, так как при хроническом сапе лошади могут быть плохо упитанными. При сапе на коже обнаруживают язвы, рубцы, утолщения, главным образом на конечностях. Наблюдается воспаление лимфоузлов и сосудов, которые набухают и выступают над поверхностью кожи в виде шнуров. Иногда отмечают утолщение задних конечностей (слоновость). У жеребцов могут быть орхиты;
2) измерение температуры тела. При сапе возможна высокая температура тела, в особенности в начале болезни;
3) исследование подчелюстных лимфоузлов. При остром сапе с поражением носовой полости подчелюстные лимфоузлы горячие, болезненные, не резко отграниченные. При хронических случаях подчелюстные лимфоузлы плотные, бугристые, неподвижные, холодные, безболезненные;
4) исследование носовой полости начинают с внешнего осмотра. При сапе наблюдают носовое истечение различного характера. Дальнейшее исследование носовой полости проводят с помощью рефлектора (глазного зеркала). Для этого лошадь ставят хвостом к источнику света. Помощник несколько приподнимает голову. Оператор становится лицом к свету спереди головы лошади и несколько в стороне. Большим и указательным пальцами левой руки он расширяет ноздри лошади, а правой рукой улавливает свет при помощи рефлектора и направляет его в носовую полость. Осматривать носовую полость следует как можно глубже. При сапе у лошадей на носовой перегородке могут быть язвы или звездчатые рубцы;
5) в заключение клинического осмотра исследуют легкие с помощью аускультации и перкуссии. При легочной форме сапа, которая протекает в виде пневмонии, наблюдаются отклонения со стороны органов дыхания, кашель.
Маллеинизация лошадей.Маллеин для диагностики сапа применяют у Лошадей, мулов, ослов и верблюдов. Его вводят путем аппликации на конъюнктиву глаза или подкожно (редко).
Основной метод диагностики сапа — глазная маллеинизация (офтальмомаллеинизация). Предварительно проверяют состояние глаз у лошади, так как маллеинизацию можно проводить только на здоровом глазе. Как правило, маллеин наносят на конъюнктиву левого глаза. Берут стерильную глазную пипетку, вскрывают ампулу с маллеином, наполняют пипетку, открывают глаз большим и указательным пальцами левой руки и наносят на конъюнктиву 3-4 капли маллеина.
Для каждой лошади используют отдельную стерильную пипетку. Отработавшие пипетки и ампулы из-под маллеина стерилизуют кипячением.
Реакцию учитывают через 3, 6, 9, 12 и 24 ч после введения маллеина. При учете результатов обязательно нужно открывать глаз лошади. На весь период исследования (сутки) лошадей освобождают от работы и держат на коновязи.
Положительная реакция — гнойный конъюнктивит различной степени. Конъюнктива интенсивно краснеет, набухает, веки припухают, глаз закрывается, в глазной щели по краю нижнего века появляется шнурок гноя, спускающийся у внутреннего угла глаза (рис. 22). При слабовыраженной реакции гной обнаруживают только во внутреннем углу глаза.
Сомнительная реакция — интенсивное покраснение глаза, припухлость век и слезотечение; во внутреннем углу глаза незначительное количество гноя (не больше капли).
Отрицательная реакция — состояние глаза не изменяется, или наблюдают легкое покраснение конъюнктивы и слезотечение.
Лошадям с отрицательной или сомнительной реакцией через 5-6 дней повторно вводят маллеин в тот же глаз. С лошадьми, давшими положительную или вторично сомнительную реакцию, поступают согласно инструкции по борьбе с сапом.
Рис. 22. Положительная реакция при глазной маллеинизации |
На всех лошадей, подвергавшихся маллеинизации, составляют опись с указанием номера и клички лошади, пола и примет, даты введения маллеина, результатов учета реакции через 3, 6, 9, 12 и 24 ч, даты повторной маллеинизации (через 5-6 дней) и общего результата. Результаты маллеинизации оформляют актом, указывая наименование населенного пункта (хозяйства), дату обработки, кто ее проводил, сколько лошадей подверглось маллеинизации, каким препаратом проводили обработку (серия, биофабрика, изготовившая маллеин, срок годности, номер государственного контроля), каким методом вводили препарат, общий расход маллеина, результаты исследования: сколько лошадей выделено с положительной, сомнительной и отрицательной реакциями, клички и номера положительно и сомнительно реагирующих. Акт подписывают ветеринарные специалисты, а также заведующий фермой, бригадир.
Дата добавления: 2015-11-23 ; просмотров: 6773 | Нарушение авторских прав
Исследования на сап лошадей
ИНСТРУКЦИЯ
ПО ПРЕДУПРЕЖДЕНИЮ И ЛИКВИДАЦИИ САПА
МИНИСТЕРСТВО
СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА
И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
(Минсельхозпрод России)
ДЕПАРТАМЕНТ ВЕТЕРИНАРИИ УТВЕРЖДАЮ
Главный государственный
03.02.97г. № 13-3-2/845 ветеринарный инспектор
В.М.Авилов
ИНСТРУКЦИЯ
по предупреждению и ликвидации сапа
1. Общие положения
1.1. Сап – инфекционная болезнь лошадей, ослов, мулов и других
непарнокопытных семейства лошадиных, вызываемая микробом, относящимся
к роду Рseudomonas, виду Р.mallei , и протекающая в основном хрони-
чески. В естественных условиях могут болеть также хищники семейства
кошачьих (при поедании мяса больных сапом животных), верблюды и че-
ловек.
1.2. Мероприятия против сапа заключаются в предупреждении заноса
возбудителя в страну, в систематическом контроле за благополучи-
ем поголовья лошадей (ослов, мулов), недопущении распространения бо-
лезни и ликвидации ее в случае появления.
2. Диагностика сапа
2.1. Диагноз на сап устанавливают на основании результатов клини-
ческого осмотра, серологических, аллергических, патологоанатомичес-
ких, а также бактериологических и гистологических исследований с уче-
том эпизоотологических данных. Исследования проводят в соответствии с
Наставлением по диагностике сапа, утвержденным Департаментом ветери-
нарии Минсельхозпрода России, и в порядке, предусмотренном пунктом
3.9. настоящей инструкции.
2.2. Диагноз на сап считают установленным в следующих случаях:
– обнаружение характерных для сапа изменений во внутренних орга-
нах и тканях;
– выделение культуры из патологического материала со свойствами,
характерными для возбудителя сапа;
– получение положительных результатов биологического исследова-
ния, даже если культуры возбудителя из исходного материала не выделе-
ны;
2.3. Сап необходимо дифференцировать от эпизоотического лимфанги-
та (африканского сала, бластомикоза), язвенного лимфангита и мыта.
Дифференцирующими признаками при возникновении этих болезней счи-
тают отрицательные результаты маллеинизации животных и серологических
исследований на сап, а также обнаружение криптококков (Сгурtococcus
farciminosus) в содержимом абсцессов при эпизоотическом лимфангите,
наличие стрептококков (Streptococcus equi) в гное при мыте и Соryne-
Ьасtегium рseudotuberculesis при язвенном лимфангите.
3. Мероприятия по предупреждению заноса и распространения
сапа в Российской Федерации.
3.1. В целях предотвращения заноса на территорию страны сала до-
пускается ввоз только здоровых лошадей (ослов, мулов) из хозяйств
( с территорий ), благополучных по этой болезни, с соблюдением вете-
ринарно-санитарных правил, устанавливаемых Департаментом ветеринарии
Минсельхозпрода России.
3.2. Импортируемые лошади (ослы, мулы) подлежат карантинированию и
обследованию на сап в стране поставщика в порядке и методами, предус-
мотренными Ветеринарными требованиями при импорте лошадей в Российс-
кую Федерацию, что должно быть указано в ветеринарном сертификате
ввозимых животных.
3.3. Импортированных животных помещают в карантин на ЗО суток и
обследуют в начале и в конце срока карантинирования путем клиническо-
го осмотра, глазной маллеиновой пробой, исследованием сыворотки крови
в РА.
3.4. Экспортируемых животных обследуют в соответствии с требова-
ниями страны-импортера. Животных, при обследовании которых подучен
положительный результат в РСК при отрицательных результатах других
исследований на сап, допускается использовать без ограничений внутри
страны, вывод их за пределы страны запрещен.
3.5. Всех взрослых лошадей (ослов, мулов) находящихся в собс-
твенности организаций (любой организационно-правовой формы), индиви-
дуальных предпринимателей, в том числе глав крестьянского (фермерско-
го) хозяйства и граждан субъектов Российской Федерации, расположенных
вдоль юго-восточной и южной границ страны, обследуют на сап не менее
двух раз в год – весной и осенью путем клинического осмотра и
исследования сыворотки крови в РА.
Плановые обследования на сап животных в других субъектах Российс-
кой Федерации проводят один раз в год.
3.6.На всей территории страны лошади (ослы, мулы) не ранее чем за
30 сут. До продажи (перевода) в другие хозяйства (организации)
должны подвергаться клиническому осмотру, и исследованию сыворотки
крови в РА.
3.7. Всех лошадей (ослов, мулов), поступающих в хозяйство, помеща-
ют в карантин на 30 сут. Животных подвергают клиническому осмотру и
исследуют сыворотку крови в РА в начале и в конце срока карантиниро-
вания.
3.8.При отрицательных результатах этих исследований животных ис-
пользуют без ограничений.
3.9. При положительном результате какого-либо исследования таких
животных считают подозреваемыми в заболевании сапом. В этом случае
всех лошадей (ослов, мулов) обследуемой группы изолируют в помещении,
в котором они содержались, или в специально выделенной конюшне. Жи-
вотных, подозреваемых в заболевании, обследуют с применением подкож-
ной маллеиновой пробы.
3.9.1.При отрицательном результате подкожной маллеиновой пробы
животных считают благополучными по сапу.
3.9.2. При положительном результате подкожной маллеиновой пробы с
целью уточнения диагноза реагирующих животных убивают и подвергают
патологоанатомическому исследованию на сап без снятия шкуры и с соб-
людением условий, предотвращающих распространение возбудителя болезни.
3.9.2.1. В случае обнаружения характерных для сапа изменений во
внутренних органах и тканях убитых животных диагноз на сап считают
установленным, туши животных уничтожают сжиганием на месте убоя
(вскрытия). В хозяйстве проводят мероприятия в соответствии с разде-
лом 4 настоящей инструкции.
3.9.2.2. При отсутствии на вскрытии характерных для сапа измене-
ний для проведения бактериологического исследования отбирают от уби-
тых животных пробы материала: подчелюстные, заглоточные, бронхиаль-
ные, средостенные лимфатические узлы, носовую перегородку, гортань,
глотку, трахею, а также измененные участки легкого, печени, селезен-
ки, кожи с подкожной клетчаткой и укладывают их в водонепроницаемую
емкость с плотно закрывающейся крышкой.
Одновременно из этого материала вырезают кусочки размером 2 куб.см
для гистологического исследования, укладывают в банку и заливают
10%-ным раствором формалина в соотношении 1:5. Екости плотно закры-
вают и опечатывают печатью главного ветеринарного врача района.
Материал срочно направляют с нарочным в ветеринарную лабораторию
для исследования на сап.
Помещения, окружающую территорию, оборудование, телеги, сани, уп-
ряжь, предметы ухода за животными, одежду и обувь обслуживающего
персонала дезинфицируют по п. 4.7. Туши сжигают.
Остальных животных обследуемой группы (табуна) содержат изолиро-
ванно до получения результатов лабораторного исследования.
3.9.2.3. При отрицательных результатах лабораторных исследований
изоляцию животных прекращают.
3.9.3. В случае подтверждения диагноза на сап в очаге болезни
проводят мероприятия в соответствии с разделом 4 настоящей инструкции.
4 . Мероприятия по ликвидации сапа
4.1. При выявлении животных, больных сапом, немедленно сообщают
об этом ветеринарному управлению (Отделу, объединению) области, края,
республики и принимают меры к обнаружению источника возбудителя ин-
фекции. В порядке, предусмотренном Законом Российской Федерации “О
ветеринарии”, решением органов местного самоуправления районов и го-
родов по представлению соответствующих органов управления Государс-
твенной ветеринарной службы Российской Федерации населенный пункт
(при табунном содержании – табун) объявляют неблагополучным по сапу и
устанавливают карантин.
Ветеринарный специалист, обслуживающий населенный пункт, состав-
ляет план мероприятий по ликвидации сапа, согласовывает его с главным
ветеринарным врачом района и центром санэпиднадэора.
4.2. Всех лошадей, ослов, мулов и верблюдов неблагополучного по са-
пу пункта каждые 7-8 сут. подвергают клиническому осмотру и исследуют
сыворотку крови в РА.
4.3. В неблагополучном пункте всех животных с положительным ре-
зультатом какого-либо исследования считают больными сапом и убивают,
туши сжигают на месте убоя без снятия шкуры и вскрытия.
Остальных лошадей (ослов, мулов) бывших в контакте с больными жи-
вотными, отправляют автотранспортом с водонепроницаемым кузовом на
санитарную бойню мясокомбината. Продукты убоя используют в соответс-
твии с действующими Правилами ветеринарного осмотра убойных животных
и ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов.
4.4. Помещения, где содержались лошади (ослы, мулы), оборудова-
ние, автотранспорт после перевозки животных, окружающую помещения
территорию, телеги, сани, металлические предметы ухода за животными,
одежду и обувь обслуживающего персонала дезинфицируют по п.4.7., неме-
таллические предметы ухода, упряжь сжигают.
Грубые корма могут быть использованы для скармливания только не-
восприимчивым к сапу животным неблагополучного пункта.
4.5. В неблагополучном пункте запрещается:
-въезд на лошадях (ослах, мулах) и выезд за пределы населенного
пункта;
– пастьба, перегруппировка, ввод и вывод лошадей (ослов, мулов);
– вывоз за пределы пункта и откармливание лошадям (ослам, мулам)
грубых кормов, при заготовке и перевозке которых использовались боль-
ные сапом и бывшие с ними в контакте животные.
4.6. На дорогах, ведущих в неблагополучный населенный пункт, выс-
тавляют знаки, оповещающие о карантине, и устанавливают круглосуточ-
ные посты.
4.7.1. Для дезинфекции помещений, оборудования, телег, саней, ас-
фальтовых, бетонных и земляных покрытий, навоза, остатков корма, ме-
таллических предметов ухода за животными применяют раствор хлорной
извести, содержащей не менее 3% активного хлора, 20%-ную взвесь
свежегашеной извести, 4%-ный горячий раствор едкого натра, из расче-
та О,5 куб.дм на 1 кв.м. Экспозиция 2 ч.
Жидкие сточные воды засыпают хлорной известью из расчета 200 г/куб.дм
и перемешивают.
Помещения предварительно орошают дезраствором, затем их подверга-
ют механической очистке и дезинфекции. Навоз, остатки корма после де-
эинфекции вывозят и сжигают. Помещения после дезинфекции подвергают
побелке 20%-ным раствором свежегашеной извести.
Почву обеззараживают 10%-ным горячим раствором едкого натра, 4%-ным
раствором формалина из расчета 5 куб.дм/кв.м или 5 %-ным осветленным
раствором хлорной извести из расчета 10 куб.дм/кв.м.
4.7.2.Защитную одежду, полотенца кипятят в течение 15 мин в
2%-ном растворе соды. Резиновые перчатки, фартуки погружают на 1 ч в
1-3%-ный раствор хлорамина.
Сапоги, галоши, упряжь протирают дважды с интервалом в 15 мин.
салфеткой, смоченной 1-3 %-ным раствором хлорамина.
Личную одежду обслуживающего персонала дезинфицируют в пароформа-
линовой камере.
4.7.3. Открытые части тела дезинфицируют 0,5-1 %-ным раствором
хлорамина, 80°-ным спиртом.
4.7.4.Транспорт дезинфицируют 1-3 %-ным раствором хлорамина из
расчета 300 куб.см/кв.м.
5. Меры личной профилактики.
5.1. Персонал, обслуживающий изолированных животных, должен быть
проинструктирован главным ветеринарным врачом района о технике безо-
пасности при сапе и обеспечен защитной одеждой – комбинезонами, хала-
тами, шапочками или косынками, рукавицами, резиновыми сапогами, а
также полотенцами.
Лиц, имеющих поражения к ссадины на открытых частях тела, к раба-
те в изоляторе не допускают.
5.2. В помещении должны быть установлены умывальник, емкости с
дезраствором и пароформалиновая камера.
5.3. Вскрытие животных следует проводить обязательно в защитных
очках, ватно-марлевой маске, клеенчатом фартуке и резиновых перчатках.
5.4. В помещении запрещается принимать пищу, пить и курить. Каж-
дый раз после выполнения той или иной работы в изоляторе подвергают
дезинфекции руки и другие открытые участки тела, спецодежду и спецо-
бувь.
6. Населенный пункт объявляют благополучным по сапу в установлен-
ном порядке через 2 мес. после последнего случая выявления и убоя
больных и бывших с ними в контакте восприимчивых к сапу животных при
получении за этот период отрицательных результатов клинического ос-
мотра и исследования сыворотки крови в РА, проводимых в соответствий
с п. 4.6, и выполнении комплекса заключительных мероприятий по унич-
тожению возбудителя болезни во внешней среде.
7. Должностные лица и граждане, несут персональную ответствен-
ность за правильность организации и проведения мероприятий по предуп-
реждению и ликвидации сапа, предусмотренных настоящей Инструкцией, в
соответствии с Законом “О ветеринарии” и другими актами законодатель-
ства Российской Федерации.
С изданием настоящей инструкции на территории Российской Федера-
ции не действует “Инструкция о мероприятиях против сапа”, утвержден-
ная Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства
СССР 24мая 1985года.
Сап лошадей
![]() | Сап (malleus) – инфекционная болезнь однокопытных животных, характеризующаяся лихорадкой, истощением и развитием в паренхиматозных органах, чаще в легких, на слизистых оболочках и коже сапных узелков и язв. Этиология. Возбудитель болезни – Actinobacillus mallei, грамотрицательная, короткая, неподвижная, не образующая спор и капсул палочка с округленными краями бактерия. Во внешней среде малоустойчива. Культуры бактерии сапа выращивают на обыкновенных нейтральных питательных средах, содержащих 5% глицерина. Дезосредства в обычных концентрациях губительно действует на возбудителя. Антибиотики и сульфаниламидные препараты также губительно действуют на сапных бактерий. Эпизоотологические данные. Восприимчивы лошади, ослы, мулы, лошаки, реже болеют верблюды и хищные животные (в зоопарках). Болеет и человек. Источником возбудителя инфекции являются больные животные, в том числе лошади с хроническим и латентным сапом, не имеющие клинических признаков. Факторами передачи являются контаминированные корм, воду, навоз, подстилку, сбрую и др. Воротами инфекции служат пищеварительный тракт (носоглотка, кишечник), реже органы дыхания, поврежденная кожа и слизистая оболочка половых путей. Болезнь проявляется спорадически или в виде эпизоотических вспышек. Сап среди восприимчивых животных распространяется сравнительно медленно, так как при хроническом течении, особенно при латентной форме, возбудитель не всегда выделяется во внешнюю среду. При тесном размещении лошадей в плохо вентилируемых конюшнях, а также при пастбищном содержании болезнь может за короткое время охватить значительное поголовье животных. Инкубационный период при естественном заражении не превышает 2-3 недель, при экспериментальном – 2-5 дней. Течение острое, хроническое и латентное. Различают легочную, носовую и кожную формы сапа. Для острого течения характерны повышения температуры тела до 41-42 °С, сильное угнетение, покраснение слизистых оболочек носа и глаз, пульс слабый, частое дыхание. Через 2-8 дней на слизистой оболочке носа образуются мелкие узелки желтоватого цвета с красным ободком. Узелки некротизируются и образуются язвы с неровными краями. Появляется истечение из носа. Подчелюстные лимфатические узлы увеличиваются в объеме, становятся плотными, бугристыми, неподвижными. Иногда поражается кожа на внутренней поверхности бедер, голове, шее, препуции (образуются узлы и язвы). Острое течение сапа длиться 8-30 дней, заканчивается смертью животного или принимает хроническое течение. При хроническом течении болезнь длится от нескольких месяцев до нескольких лет, часто протекает незаметно. На слизистой оболочке носа обнаруживают рубцы звездчатой формы, возникающие на месте заживших язв. При кожной форме сапа на тазовых конечностях иногда развиваются утолщения (слоновость). При хроническом сапе периодически наступают рецидивы. Латентную форму наблюдают в стационарно неблагополучных пунктах, которая протекает в течение многих лет без проявления клинических признаков. Патологоанатомические изменения. В легких и других паренхиматозных органах узелки серо-белого цвета с красным поясом, иногда очаги бронхопневмонии и некроза. На слизистой носа узелки, язвы или рубцы. Регионарные лимфатические узлы увеличены, содержат обызвествленные узелки или очаги некроза. Диагноз. Учитывают эпизоотологические, клинические патологоанатомические, гистологические данные, проводят аллергическое, серологическое и бактериологическое исследования. Применяются глазная и значительно реже подкожная маллеинизация. Дифференциальный диагноз. Сап лошадей необходимо дифференцировать от мыта, эпизоотического лимфангита. Основной метод дифференциальной диагностики сапа лошадей лабораторный и глазная маллеинизация. С целью профилактики заболевания, всех взрослых лошадей исследуют на сап офтальмомаллеинизацией за 2 недели до передачи другим хозяйствам, отправки на выставки, спортивные состязания, а также до убоя на мясо подвергают клиническому исследованию на сап и маллеинизации. Все поголовье однокопытных животных во всех категориях хозяйств подвергают клиническому осмотру на сап и маллеинизации один раз в год. При установлении диагноза на сап хозяйство (ферму) объявляют неблагополучной и накладывают карантин. Запрещают передачу однокопытных животных другим хозяйствам, вывоз фуража, перегруппировку лошадей внутри хозяйства, а также убой восприимчивых животных на мясо. Животных с характерными для сапа клиническими признаками, а также не имеющих клинических признаков болезни, но положительно реагирующих на маллеин, признают больными, немедленно изолируют и уничтожают вместе с кожей (трупы сжигают), остальных лошадей карантинного отделения убивают на санитарной бойне на мясо. Животных, подозреваемых в заражении, через каждые 15 дней исследуют на сап методом глазной маллеинизации до получения трехкратных отрицательных результатов по всей группе. Карантин снимают через 2 месяца после убоя больных и бывших с ними в контакте животными и получения отрицательных результатов исследовании на сап. Исследования на сап лошадей4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ Лабораторная диагностика сапа Дата введения: с момента утверждения 1. Методические указания разработаны Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Ю.В.Демина, Н.Д.Пакскина); ФГУЗ “Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт” Роспотребнадзора (В.И.Илюхин, В.В.Алексеев, Н.П.Храпова, В.А.Антонов, Т.В.Сенина). 2. РЕКОМЕНДОВАНЫ К УТВЕРЖДЕНИЮ Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. 3. УТВЕРЖДЕНЫ Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 14 января 2011 г. 4. ВВЕДЕНЫ ВПЕРВЫЕ. 1. Область применения1. Область применения 1.1. Методические указания предназначены для специалистов как в системе органов, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологический надзор, так и в системе лечебно-профилактических организаций независимо от их организационно-правовой формы и формы собственности. 1.2. В методических указаниях определены порядок забора, транспортирования и выполнения лабораторных исследований биологического материала от больных и умерших людей, животных с подозрением на сап, материала из объектов окружающей среды, подозрительного на контаминацию возбудителем данного заболевания. 2. Нормативные ссылки2.1. Санитарно-эпидемиологические правила СП 1.3.1285-03 “Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)”. М., 2003. 2.2. Санитарные правила СП 1.2.036-95 “Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности”. М., 1996. 2.3. МУ 1.3.1794-03* “Организация работы при исследованиях методом ПЦР материала, инфицированного микроорганизмами I-II групп патогенности”. М., 2004. 2.4. МУК 4.2.1890-04 “Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам”. М., 2004. 2.5. МУ 3.5.5.1034-01* “Обеззараживание биологического материала и объектов внешней среды, зараженных бактериями I-IV групп патогенности, при исследованиях методом ПЦР”. М., 2001. 2.6. Методические рекомендации “Лабораторная диагностика, лечение и профилактика сапа”. Волгоград, 1995. 2.7. Практическое руководство “Специфическая индикация патогенных биологических агентов”. М., 2006. 2.8. Практическое руководство “Лабораторная диагностика опасных инфекционных болезней”. М., “Медицина”, “Шико”, 2009. Список сокращенийгуаниновые и цитидиновые нуклеотиды жидкая минимальная среда с антибиотиками мясо-пептонный агар (бульон) с глицерином минимальная подавляющая концентрация метод флуоресцирующих антител нормальная кроличья сыворотка нормальная лошадиная сыворотка нитроцеллюлозная мембрана (фильтр) показатель повреждения нейтрофилов полимеразная цепная реакция реакция непрямой гемагглютинации реакция связывания комплемента реакция торможения непрямой гемагглютинации твердофазный иммуноферментный анализ (метод) триптиказосоевый агар (бульон) фосфатный буферный раствор + Твин-20 цитратно-фосфатный буферный раствор 3. Общие сведенияСап – зоонозная инфекция, протекающая у человека в острой септической и хронической формах со специфическими поражениями кожи, слизистых оболочек, мышц, суставов и внутренних органов. Основным резервуаром инфекции в естественных условиях являются преимущественно однокопытные – лошади, ослы, мулы, а также верблюды и дикие хищники семейства кошачьих. В настоящее время сап у лошадей отмечается в Монголии, Турции, Иране, Ираке, Китае, Индии, Индонезии и на Филиппинах. В России существует опасность заноса инфекции из-за рубежа. Источником инфекции для людей служат животные, обычно лошади. Заражение происходит через выделения больного животного: носовой секрет и отделяемое кожных язв, реже содержимое кишечника, моча, молоко. Восприимчивость людей к сапу оценивается неоднозначно. С одной стороны, в начале прошлого века количественное соотношение больных лошадей и имевших к ним отношение людей измерялось как 200-400 к 1, на основании чего делался вывод о высокой видовой устойчивости человека к этой инфекции. С другой стороны, соотношение хронических и острых форм заболевания у лошадей составляет 9:1, а среди людей -1:1, что предполагает более высокую чувствительность людей к сапу. Основной путь заражения в естественных условиях – контактный (80% случаев) через кожу верхних и нижних конечностей, лица и шеи, значительно реже через слизистые оболочки верхних дыхательных путей и конъюнктиву глаз. Фактически сап является профессиональной болезнью. В прошлом сапом заболевали конюхи, ветеринары, работники конских боен. Описаны случаи внутрилабораторных заражений ветеринарных и медицинских работников, известны случаи заболевания после повреждения кожи при вскрытии трупов больных сапом. Считается, что аэрозоли культур высоко инфекциозны для человека. Большинство описанных случаев заражения сапом в лабораторных условиях связано с проникновением возбудителя через дыхательные пути. При анализе профессиональных случаев заболеваний микробиологов, работающих с особо опасными инфекциями, В. mallei ставят в один ряд с возбудителями чумы и туляремии. В последнее время описаны 2 случая внутрилабораторного заражения (по одному в США и в России), в одном случае заболевание закончилось летальным исходом, в другом – потребовало длительного комплексного лечения химиопрепаратами. Передача от человека к человеку спорна, хотя в литературных источниках начала XX века описаны отдельные случаи таких заражений – при уходе за больными людьми и животными без специальных мер предосторожности. Возбудитель сапа Burkholderia mallei относится к патогенным представителям рода Burkholderia (выделен в автономную таксономическую единицу в 1992 г. из представителей 2-й группы рРНК-ДНК гомологии обширного таксономически аморфного рода Pseudomonas), вызывает тяжелое инфекционное заболевание у человека и довольно широкого круга животных. В экспериментальных условиях наиболее чувствительными к сапу животными являются кошки, золотистые хомячки и морские свинки. Кролики мало восприимчивы к сапу. Белые мыши и крысы – высокорезистентны. Возбудитель сапа – неподвижная (атрих) тонкая полиморфная палочка, прямая или несколько изогнутая, с закругленными концами, размером 0,4х3-5 мкм. Наряду с типичными клетками могут встречаться очень короткие коккобациллярные (в молодых культурах), булавовидные и ветвящиеся формы (в старых культурах). Спор и капсул возбудитель сапа не образует. В. mallei относительно устойчива во внешней среде: в подсохших выделениях больных микроб сохраняет жизнеспособность до трех месяцев, в воде и различных гниющих субстратах – до месяца. При нагревании взвеси чистой культуры возбудитель сапа погибает при 60 °С через 2 ч и более, при кипячении – в течение нескольких минут. Хлорная известь (2% раствор) вызывает гибель В. mallei через несколько мин, 1% едкий натр – через 1 ч. Возбудитель сапа обладает устойчивостью к пенициллинам, полимиксинам, ванкомицину, хиноксидину и диоксидину, что используется в качестве дифференциального теста. 4. Материал для исследования, отбор и транспортирование пробВся работа с исследуемым материалом, подозрительным на зараженность возбудителем мелиоидоза, проводится в соответствии с требованиями по безопасности работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (санитарными правилами СП 1.3.1285-03 “Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)” и СП 1.2.036-95 “Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности”, а также методическими указаниями МУ 1.3.2569-09 “Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности”). Идентификация возбудителя сапа предусматривает выделение возбудителя (или антигенов) из объектов исследования и определения специфических антител в крови людей и животных. Схема и последовательность бактериологических и иммунологических этапов представлены ниже (рис.1). Рис.1. Этапы идентификации Burkholderia malleiРис.1. Этапы идентификации Burkholderia mallei Примечание: Постановка, оценка реакций и расшифровка сокращений по тексту. Исследование на сап начинается одновременно бактериологическим, биологическим и серологическим методами. С момента поступления материала проводят бактериоскопию мазков в световом и люминесцентном микроскопах, бактериологическое исследование, направленное на выделение культуры сапного микроба, биологическое исследование, как дополнительное для выделения “чистой” культуры, и серологическое исследование нативного материала для выявления видоспецифического антигена или специфических антител. Материалом для исследования от людей и животных с подозрением на сап могут быть выделения из носа, отделяемое язв, пунктаты лимфоузлов, мокрота, испражнения. Материал по возможности должен быть исследован до начала лечения химиотерапевтическими препаратами. При вскрытии трупов животных берут для анализа кусочки органов (селезенка, печень, легкое), лимфатических узлов, кровь, костный мозг. При длительном транспортировании в стационарные бактериологические лаборатории рекомендуется пользоваться средами с ингибиторами (п.5.1). Заключение бактериолога дается на основании бактериоскопического, бактериологического и серологического исследования. 5. Методы исследования материала5.1. Бактериологический методДля выделения возбудителя сапа используют мясопептонный агар и бульон рН 6,8-7,0 с 4% глицерина (МПГА, МПГБ). Можно использовать агар на основе гидролизата казеина, а также питательный агар и триптиказосоевый агар (Difco, США). При использовании “загрязненного” материала (что подтверждается микроскопией) используют среду с ингибиторами: Исследования на сап лошадейЦель занятия: изучить основные методы диагностики сапа, мыта, эпизоотического лимфангита и систему противоэпизоотических мероприятий. Материалы и оборудование: таблицы (сап, мыт, эпизоотический лимфангит), слайды, эпидиоскоп, маллеин, глазные пипетки, ветеринарное законодательство. Место проведения занятия: аудитория кафедры эпизоотологии. Сап — опасная болезнь однокопытных, протекающая в основном в хронической форме и передающаяся человеку. Возбудитель — Pseudomonas mallei. Методы диагностики. Диагноз устанавливают на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патолого-анатомических изменений, результатов аллергических и лабораторных исследований (серологических, бактериологических, биологических). Согласно эпизоотологическим данным в естественных условиях к сапу восприимчивы однокопытные животные (лошади, ослы, мулы, лошаки), реже — верблюды. Очень чувствительны хищники из семейства кошачьих (львы, тигры, рыси, пантеры и т. д.), медведи. Хищники заражаются при поедании мяса, контаминированного возбудителем сапа. Болезнь встречается в виде спорадии или эпизоотии. Сезонность нехарактерна, но сап чаще регистрируют в осенне-зимний период. Пути заражения: алиментарный, контактный, аэрогенный, а также при случке животных. Клинические признаки проявляются через 1 месяц после заражения и позже. Различают носовую, легочную и кожную формы сапа. У больных животных отмечают высокую температуру (41…42 °С), слабый пульс, частое прерывистое дыхание. На слизистой дыхательных путей появляются мелкие желтоватые узелки, окруженные красным ободком, в дальнейшем узелки подвергаются некротическому распаду и на их месте образуются язвы — круглые или овальные с неровными краями. Дно язв саловидное, покрытое гнойным экссудатом. Патологоанатомические изменения находят в легких, печени, селезенке, лимфатических узлах, на слизистой оболочке носовой полости и на коже. Специфические узелки в легких могут быть на различной стадии развития: в острых случаях узелки стекловидные или серовато-белого цвета, окружены красным пояском гиперемии, а в хронических — инкапсулированы и пропитаны солями извести. Для аллергической диагностики сапа применяют маллеиновую пробу (глазную, подкожную и внутрикожную). Глазную пробу считают основным методом диагностики сапа у лошадей (верблюдам аллерген вводят внутривенно). Пробу выполняют двукратно с промежутком 5…6 дней. На конъюнктиву здорового глаза утром наносят 3…4 капли маллеина. Реакцию учитывают через 3, 6, 9 и 24 ч. Офтальмопробу считают положительной при развитии гнойного конъюнктивита. Конъюнктива интенсивно краснеет, набухает. Веки припухшие, глаз закрыт. В глазной щели, по краям нижнего века, появляется шнурок гноя, спускающийся с внутреннего угла глаза (рис. 14). Наряду с этим у некоторых лошадей отмечают се- Розно-гнойное истечение из ноздри. Реакцию считают сомнительной при интенсивном покраснении конъюнктивы, припухлости век и слезотечении. Во внутреннем углу глаза появляется незначительное количество (капля) гноя. При отрицательном результате офтальмопробы глаз остается нормальным или обнаруживают легкое покраснение конъюнктивы и слезотечение. В случае сомнительной реакции пробу повторяют через 5…6дней, нанося аллерген на конъюнктиву того же глаза. Повторная реакция проявляется через 2…5 ч и обычно бывает более резко. Подкожную пробу применяют при заболевании глаз, а также при неясных показаниях глазной пробы. За 1 сут до введения маллеина у лошади определяют среднесуточную температуру тела, которая не должна превышать 38,5 °С. Рис. 14. Положительный результат офтальмопробы при сапе (пояснение в тексте). Для удобства наблюдения за температурной реакцией 1 мл маллеина вводят вечером (в 22…24 ч) в подкожную клетчатку в области подгрудка или шеи. Температуру тела начинают измерять на другой день: в 6 ч утра, т. е. через 6…8 ч после введения препарата, затем каждые 2 ч до 20 ч и, наконец, через 24 и 36 ч после введения аллергена. Исследуемую лошадь в течение 20 ч запрещается поить холодной водой. Реакцию считают положительной, если отмечен типичный подъем температуры до 40 °С и выше. Внутрикожную пробу применяют в основном для полудиких табунных лошадей. Маллеин вводят в области шеи в дозе 0,2 мл. Реакцию учитывают через 48 ч. Пробу считают положительной, если на месте введения маллеина развивается строго очерченная, горячая, болезненная припухлость тестоватой консистенции размером 2х 3,5 см и больше. Основной метод лабораторной диагностики сапа — серологический (РА); другие методы (микроскопический, бактериологический, биологический и гистологический) используют при необходимости. С помощью РА исследуют животных, давших положительную реакцию на маллеин. Диагноз считают установленным при обнаружении характерных для сапа изменений во внутренних органах, выделении культуры возбудителя (P. Mallei), положительной биопробе. Профилактические и оздоровительные мероприятия. Для профилактики болезни все ввозимое в страну поголовье лошадей содержат в карантине в течение 30 дней с исследованием в этот период клиническим, аллергическим (офтальмопробой) и серологическим методами (РА). Всех взрослых лошадей на территории страны ежегодно исследуют на сап клинически и серологически. В сомнительных случаях прибегают к аллергическому, патологоанатомическому и бактериологическому исследованиям. Исследование лошадей на сап аллергическим методом включают в ежегодный план противоэпизоотических мероприятий. Кроме того, всех лошадей, направляемых на убой, за 3 дня до вывоза из хозяйства проверяют на сап офтальмопробой. Всех лошадей, а также ослов, мулов в хозяйствах, где зарегистрированы случаи заболевания или выделены животные, положительно реагирующие на маллеин исследуют путем клинического осмотра и двукратной офтальмопробой с интервалом 5…6 дней не менее 2 раз в год. При установлении диагноза на сап карантин накладывают в зависимости от распространения болезни: на отдельные неблагополучные бригады, фермы, конюшни, табуны или хозяйство в целом. Ветеринарный врач исследует всех лошадей путем клинического осмотра (не реже 1 раза в 3…5 дней) и двукратной маллеинизацией. В зависимости от результатов исследований все конское поголовье неблагополучного хозяйства подразделяют на четыре группы. Первая группа — явно больные. Всю группу уничтожают без всякого исследования. Заключение о наличии явно больных дает ветеринарный врач. Вскрывать трупы и снимать шкуры запрещается. Вторая группа — животные с неясными клиническими признаками сапа и положительным или сомнительным результатом офтальмопробы. Животных изолируют и на 5…6-й день повторно исследуют методом офтальмопробы. Кровь лошадей, дающих положительную реакцию, исследуют в РСК. При получении положительного результата лошадь считают больной сапом и уничтожают, а при отрицательной реакции — признают маллеинщиком. Лошадей, у которых на 5…6-й день получен отрицательный или сомнительный результат офтальмопробы, исследуют глазной маллеинизацией еще раз на 15-й день и при получении снова отрицательного результата переводят в четвертую группу. Лошадей, у которых получен на 15-й день положительный или сомнительный результат, исследуют в РСК. При положительном результате лошадь считают больной сапом и уничтожают, а при отрицательном — признают маллеинщиком. Третья группа — лошади без каких-либо признаков сапа, но с положительным или сомнительным результатом офтальмопробы. Эту группу также переводят в сапизолятор, где размещают отдельно, на 5…6-й день повторно исследуют с маллеином и в дальнейшем с лошадьми поступают так же, как и в случае со второй группой. Жеребят-сосунов от кобыл второй и третьей групп переводят в группу маллеинщиков или уничтожают вместе с кобылами. Всем маллеинщикам ставят на шее справа тавро «М» и переводят обязательно в специальное хозяйство — ПКМ (пункт концентрации лошадей маллеинщиков). При нецелесообразности перевода уничтожают. Четвертая группа — подозреваемые в заражении сапом, т. е. все остальное конское поголовье неблагополучного по сапу хозяйства с отрицательным результатом аллергической пробы. Каждые 15 дней животных осматривают и исследуют офтальмопробой вплоть до объявления хозяйства благополучным по сапу. Выпасать лошадей разрешают в пределах территории данного хозяйства на обособленном участке. Естественную случку допускают только с жеребцами аналогичной группы или применяют искусственное осеменение. Дезинфектанты, используемые при сапе: 20%-я взвесь свежегашеной извести; хлорсодержащие препараты, содержащие 3 % активного хлора, 4%-й горячий раствор гидроксида натрия, 5%-й раствор креолина. Карантин снимают через 45 дней со дня последнего случая выделения лошадей, больных сапом, при получении трехкратных отрицательных результатов офтальмопробы у всего поголовья и после заключительной дезинфекции. Мыт — острая контагиозная инфекционная болезнь лошадей, вызываемая бактерией Streptococcus equi. Методы диагностики. Диагноз устанавливают на основании клинико-эпизоотологических и патологоанатомических данных, а также результатов лабораторного исследования. Согласно эпизоотологическим данным к мыту восприимчивы лошади, ослы, мулы в возрасте от 2 мес до 5 лет. Сезонность нехарактерна. Пути заражения — воздушно-капельный, контактный и алиментарный. Клинические признаки зависят от формы болезни. Различают типичную, абортивную, метастатическую и генитальную формы мыта. Инкубационный период 4…8 дней. При патологоанатомическом исследовании обнаруживают ката-рально-гнойный ринит, фарингит, гнойный лимфаденит, перитонит, плеврит и перикардит. Лабораторные исследования включают в себя микроскопию мазков из исходного материала, посевы на питательные среды и при необходимости биопробу. Мазки окрашивают по Граму или Романовскому — Гимзе. Возбудитель мыта в мазках из гноя располагается в форме длинных цепочек, а в мазках из крови сердца и органов — одиночно, попарно, иногда короткими цепочками. Посевы из исходного материала делают в МПБ и на МПА, обогащенные 10 % сыворотки крови лошадей и 1 % глюкозы. Инкубируют в термостате в течение 18…24 ч. При росте возбудителя мыта МПБ мутнеет, в нем появляются пушистые, нежные хлопья, которые в дальнейшем оседают на дно пробирки, а на агаре мытный стрептококк образует мелкие росинчатые слизистые колонии. Для биопробы используют двух белых мышей, которых заражают подкожно в области спины гноем или культурой в дозе 0,1 мл, суспензией исходного материала или истечениями из носовой полости в дозе 0,5 мл. Зараженные животные погибают через 2…7 дней. Диагноз на мыт считают установленным: При обнаружении в мазках из исходного материала стрептококков, характерных для возбудителя данного заболевания (при наличии типичной клинической картины); Выделении культуры со свойствами, характерными для возбудителя мыта; Гибели хотя бы одной из двух мышей, зараженных исходным материалом, с последующим выделением из нее культуры со свойствами, характерными для возбудителя мыта, если даже в посевах из исходного материала культуры возбудитель не выделен. Профилактические и оздоровительные мероприятия. Лошадей завозят только в благополучные по мыту хозяйства, с соблюдением профилактического карантина. Жеребят содержат отдельно от взрослого поголовья, ежемесячно осматривают. При содержании и выращивании молодняка соблюдают ветеринарно-санитарные и гигиенические правила, обращая внимание на полноценное кормление и условия водопоя. Конюшни дезинфицируют не реже 2 раз в год. При появлении мыта всех лошадей неблагополучной конюшни, табуна осматривают с термометрией. Лошадей, больных и подозрительных по заболеванию с повышенной температурой тела, немедленно изолируют и лечат. Всех лошадей переводят на индивидуальные содержание, кормление и водопой. Перевоз и перегруппировка лошадей в период заболевания и в течение 15 дней со дня последнего случая выделения больных запрещаются. Не допускают охлаждения организма животных и использования для водопоя холодной воды. Кормят мягким сеном, корнеплодами и болтушкой из отрубей. При лечении мыта кроме обычного симптоматического лечения рекомендуют применять стрептоцид. Конюшни, в которых находились больные животные, тщательно очищают и дезинфицируют. Эпизоотический лимфангит — хронически протекающая болезнь однокопытных. Возбудитель — гриб Histoplasma farciminoswn. Методы диагностики. Диагноз устанавливают на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патолого-анатомических изменений и лабораторных исследований. Согласно эпизоотологическим данным наиболее восприимчивы лошади, мулы, лошаки, реже болеют ослы. Источником возбудителя инфекции служат больные животные, выделяющие возбудителя во внешнюю среду с гноем абсцессов и язв. Механизмы заражения: через поврежденную кожу, иногда при случке, возможны алиментарный и аэрогенный пути. Болезнь проявляется в виде спорадических случаев, редко — в виде эпизоотии, распространяется медленно. Характерна стационарность, наивысшая заболеваемость отмечена осенью и зимой. Клинические признаки проявляются после длительного инкубационного периода (1…3мес). Болезнь протекает хронически 2…8 мес, иногда более 1 года. Различают доброкачественное и злокачественное течение. Обычно процесс начинается с места травмы. При доброкачественном течении на коже конечностей, затем в области шеи, головы, холки, спины, реже — мошонки, препуция и видимых слизистых оболочек появляются небольшие плотные узелки размером с просяное зерно или горошину, которые постепенно увеличиваются, размягчаются и вскрываются. На их месте образуются круглые или овальные кратерообразные язвы. В процесс вовлекаются лимфатические сосуды и узлы, по ходу их появляются шнуры и утолщения (лимфангитные фокусы — несколько десятков), которые постепенно рассасываются, и через 2…4 мес животное выздоравливает. При злокачественном течении болезнь характеризуется образованием на различных участках тела большого числа (до 100) гнойных фокусов, которые в дальнейшем вскрываются, формируя обширные гнойные поверхности. Заживление длительное. Характерны слоновость, лихорадка, истощение. Болезнь продолжается 6…8 мес, часто заканчивается смертью. При патологоанатомическом исследовании отмечают следующие изменения: труп истощен, на коже множество гнойных фокусов и язв, лимфатические сосуды утолщены и рельефно выражены. В лимфатических узлах абсцессы, свищи. Аналогичные фокусы обнаруживают во всех внутренних органах. Лабораторные исследования включают в себя микроскопию мазков из исходного материала, посевы на питательные среды. Мазки окрашивают по Паппенгейму, Романовскому-Гимзе, Новикову или Стерку. В неокрашенных мазках из гноя легко обнаруживают гистоплазмы, а при окраске мазков в протоплазме клеток видны гранулы. В мазках из культуры находят сегментированные мицелиальные нити, которые ветвятся и образуют на концах или посередине округлые двухконтурные хламидоспоры размером 8…10 • 10 Для культивирования гистоплазм используют: МПА, МППА с 2 % глюкозы и 2,5 % глицерина; агар Сабуро с добавлением измельченных тканей лимфатических узлов или зобной железы лошади; сывороточные, яичные и другие среды. Рост обнаруживают через 2…4нед в виде коричнево-желтых точечных колоний, которые в дальнейшем превращаются в сухие наложения. Профилактические и оздоровительные мероприятия. Тщательно изучают эпизоотологическое состояние хозяйств — поставщиков ремонтных лошадей. Обязательно содержат в профилактическом карантине ввозимое поголовье. В случае возникновения болезни хозяйство объявляют неблагополучным и вводят карантин. По условиям карантина запрещают лошадей вывозить и ввозить, перегруппировывать, выпасать совместно с животными благополучных ферм, использовать молоко для пищевых целей. Кроме того, запрещены кастрация и случка. Больных лошадей изолируют и лечат, здоровых — исследуют клиническим методом каждые 5 дней. Помещения дезинфицируют каждые 15 дней после тщательной механической очистки. Средства и режимы дезинфекции при эпизоотическом лимфангите приведены в таблице 9. Навоз, подстилку и остатки корма от больных и подозрительных по заболеванию лошадей сжигают. Карантин снимают через 3 мес после выздоровления или гибели последнего больного животного, заключительного клинического осмотра всего поголовья, механической очистки и заключительной дезинфекции в хозяйстве. ЗАДАНИЕ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ Составить план оздоровительных мероприятий в хозяйстве, неблагополучном по сапу. Хронический сап лошадейБиология сапной бациллы, источники возбудителя инфекции. Эпизоотологическая обстановка по сапу в Казахстане. Признаки болезни, течение, симптомы. Порядок исследования на сап лошадей. Мероприятия по ликвидации и профилактике животных, больных сапом.
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную нижеСтуденты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны. При исследовании вначале осматривают кожный покров животного, разрезают обнаруженные узлы. Затем труп вскрывают без снятия кожи, осматривают слизистые оболочки органов дыхания, обследуют легкие, печень, селезенку, лимфатические узлы головы и других органов. Поражения легких могут быть в виде милиарных узелков, а также в форме мелких и крупных очагов (ацинозная, ацинозно-надозная лобулярная или лобарная пневмания), иногда с кавернами. Обнаруживается также саловидные участки склероза ткани. Пораженные лимфатические узлы резко увеличены, плотны, могут содержать обызвествленные инкапсулированные узелки, или быть на разрезе однородными, без рисунка, серо-белого цвета. Нередко наблюдается воспаление окружающей узел клетчатки (периаденит) с образованием общего плотного фиброзного узла. Бактериологическая диагностика включает культуральное и биологическое исследования биоматериала. Для исследования используют подчелюстные, заглоточные, бронхиальные, средостенные лимфатические узлы носовую перегородку, гортань,глотку, трахею, а также измененные участки легкого, печени, селезенки, кожи с подкожной клетчаткой. Из биоматериала делают высев с помощью пастеровской пипетки с грушей или шприца с длинной тонкой иглой (отдельного для каждого органа) в МБП и на МПА с 2-4% глицерина (МПГБ, МПГА), рН 6,8-7,0. При росте возбудителя бульон мутнеет, на дне появляется слизистый серо-белый осадок, поднимающийся штопором при встряхивании пробирки; некоторые штаммы образуют пристеночное кольцо или пленку на поверхности бульона. На агаре возбудитель сапа растет в виде гладких полупрозрачных колоний серовато-белого цвета с перламутровым оттенком, сливающихся затем в слизистой налет на поверхности среды. Для идентификации возбудителя выделенную культуру микроскопируют, мазки окрашивают по Граму, синькой Леффлера (старой) или по Романовскому-Гимза, пересевают на картофельную среду Павловского, обезжиренное молоко, определяют подвижность в висячей капле, а также исследуют в реакции агглютинации на стеле с сапной сывороткой, взятой в разведении 1:10. Возбудитель сапа представляет собой тонкие зернистые грамотрицательные палочки с закругленными концами, расположенные одиночно или короткими цепочками. При окраске по Романовскому-Гимза и синькой Леффлера отмечают хорошо выраженную зернистость. При выращивании на картофельной среде Павловского через 2-3 сут. Появляются мелкие полупрозрачные с желтоватым оттенком колонии, которые затем сливаются, образуя слизистый “медовый” налет. Цвет налета меняется от янтарно-желтого в первые 3 сут. Роста до буро-коричневого и красноватого к 6-8 сут. Возбудитель сапа медленно (на 8-14 сут.) свертывает молоко, неподвижен. Следует отметить значительное выраженное броуновское движение клеток возбудителя в висячей капле. Большинство штаммов агглютинируется сапной сывороткой. Выделенную культуру исследуют на биологические свойства. Из отобранных участков биоматериала одновременно с посевом готовят суспензию путем растирания тканей с физиологическим раствором в ступке с соблюдением условий стерильности и вводят подкожно в области шеи трем хомячкам-самцам в дозе 1 куб.см, или трем морским свинкам-самцам в дозе 3 куб.см. Выделенную из биоматериала культуру вводят двум хомячкам или двум свинкам в тех же дозах. Срок наблюдения за зараженными хомячками – 12 суток, морскими свинками – 25 суток. При наличии в биоматериале возбудителя сапа в месте подкожного введения через 3-4 суток образуется язва с уплотненными краями. Больные животные малоподвижны, у них развивается ринит, конъюнктивит, орхит. Животных с клиническими признаками болезни усыпляют эфиром, вскрывают и проводят высев из сердца, селезенки, печени, семенников на питательные среды, затем исследуют выделенную культуру, как указано в Аналогично поступают с павшими зараженными животными в легких, семенниках обнаруживают геморрагические и некротические узелки. Для гистологического исследования берут измененные кусочки органов и тканей, из которых после фиксации готовят срезы на замораживающем микротоме или после заливки целлоидином (парафином). В стадии инкапсуляции центр узелка представлен глыбчато-зернистым распадом хроматина ядер лейкоцитов и окрашен в темно-синий цвет. Внутренний слой клеточной зоны состоит из эпителиоидных клеток с фибробластами и коллагеновыми волокнами. Центральная часть обызвествленных узелков окрашена в темно-синий, а некротическая масса – в розовый цвет, Известь выступает в виде глыбок и зерен на общем розовом фоне необызвествленной некротической массы. За соединительтканный капсулой располагаются лимфоидные клетки в виде синеватого ободка. Помимо узелков, сапные изменения могут проявляться в виде диффузного вопаления с экссудативным и продуктивным акцентом, которое характеризуется наличием очагов лейкоцитарных скоплений с явлениями кариорексиса, или пролиферацией лимфоидных и эпителиоидных клеток. При положительном результате хотя бы одного из следующих методов исследования: клинического осмотра, глазной маллеиновой пробы, исследования сыворотки крови в РА или РСК животных считают подозреваемыми в заболевании сапа. Диагноз на сап считают установленным в следующих случаях: Положительная маллеиновая проба, подтвержденная результатом патологоанатомического исследования. Обнаружение характерных для сапа изменений во внутренних органах и тканях. Выделение культуры из патологического материала со свойствами, характерными для возбудителя сапа. Получение положительных результатов биологического исследования, даже если культуры возбудителя из исходного материала не выделены. Носовую форму сапа необходимо отличить от мыта, а кожную — от эпизоотического лимфангита. При мыте развивается гнойное воспаление слизистой оболочки носовой полости без образования язв и происходит абсцедирование подчелюстных лимфоузлов. При микроскопии гноя обнаруживаются мытные стрептококки. При эпизоотическом лимфангите в гное язв обнаруживают криптококков. При всех неясных случаях проводят глазную маллеинизацию. Лечение животных, больных сапом, запрещено, их уничтожают. Иммунитет при сапе нестерильный. Попавшие в организм сапные бактерии фагоцитируются нейтрофилами и макрофагами, но фагацитоз при сапе незавершенный, а фагоцитированные бактерии не погибают. Роль гуморальных факторов также незначительная. Основную защитную роль играет способность организма купировать возбудителя в сапных узелках с последующим обызвествлением патологического фокуса. Средств для специфической профилактики сапа нет. Профилактика и меры борьбы. Всех восприимчивых к сапу животных (лошадей, мулов, ослов, верблюдов) за 2 нед до передачи другим хозяйствам, отправки на выставки, спортивные состязания, перевозки по железной дороге или другим видом транспорта, а также до убоя на мясо подвергают клиническому исследованию на сап и маллеинизации. Вновь поступивших в хозяйство животных содержат в профилактическом карантине, в этот период проводят клинический осмотр и маллеинизацию. Все поголовье однокопытных животных во всех категориях хозяйств подвергают клиническому осмотру на сап и маллеинизации один раз в год. В случае возникновения сапа хозяйство (ферму) объявляют неблагополучным и накладывают карантин. Запрещают передачу однокопытных животных другим хозяйствам, вывоз фуража, перегруппировку лошадей внутри хозяйства, а также убой восприимчивых животных на мясо. Животных с характерными для сапа клиническими признаками, а также не имеющих клинических признаков болезни, но положительно реагирующих на маллеин, признают больными сапом, немедленно изолируют и уничтожают вместе с кожей. Животных, подозреваемых в заражении, через каждые 15 дней исследуют на сап методом глазной маллеинизации до получения трехкратных отрицательных результатов по всей группе. Клинические осмотры проводят раз в 5 дней. Организуют для них индивидуальное кормление и водопой. Проводят механическую очистку и дезинфекцию неблагополучных помещений и территории вокруг них. Навоз, подстилку и остатки корма из помещений, откуда были выделены больные животные, сжигают. Навоз от животных, подозреваемых в заражении, подвергают биотермической обработке в течение 2 мес. Текущую дезинфекцию проводят через каждые 15 дней (после каждой маллеинизации), а в изоляторах, где содержатся больные животные, — каждый день. Дезинфекцию проводят 3 %-ным р-ром формалина, 3 %-ным горячим (70 °С) раствором едкого натра, взвесью хлорной извести, содержащей 3 % активного хлора. |